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    關于血清的小知識

    關于血清的小知識

     

    血清的顏色為什么不一樣?

    血清中為何會有沉淀?

    如何除去血清中的沉淀?

    血清如何存儲和解凍?


     

    收到血清時需要做的

    1. 驗收

    查看血清包裝是否完好,是否有漏液破損情況,如有破損需售后處理。

     

    2. 血清有部分融化了,該怎么辦?

    運輸過程中干冰揮發,可能導致血清部分融化,此時讓血清完全解凍,輕輕搖動血清瓶,然后重新凍結血清,血清的質量不會受到影響。

     

    怎么解凍血清

    1. 將凍存的血清移到 2-8℃ 的冰箱中,過夜處理;

    2. 將血清移至 37℃ 水浴中,間歇性搖晃混勻底部的溶解物,直至全部溶解。

     

    注意:

     溫和的升溫過程可有效減少沉淀的產生,不推薦直接高溫解凍血清;

    ② 解凍之后的血清不要長時間放置在 37℃ 下;

     若血清沒有混勻且放置于高于 40℃ 的水浴中,底部的蛋白會變性形成沉淀;

     在解凍過程中,需不斷的搖晃混合以阻止形成梯度及沉淀;

     在解凍或長時間儲存之后,血清中會出現渾濁物和絮狀物;

     反復凍融會造成血清的沉淀增多,給后續處理帶來麻煩,我們建議血清的解凍/凍存次數越少越好。

    血清的顏色為什么不一樣

    胎牛血清顏色是由血紅蛋白(鮮紅)和膽紅素(黃)決定的,主要是受血紅蛋白影響。血紅蛋白含量很低時,含少量膽紅素,呈淡黃或金黃,血紅蛋白含量高時,會呈現淡紅色。

    血清的顏色取決于血紅蛋白濃度,不同批次的血清血紅蛋白含量不一樣,該參數的變化不會影響血清性能。

     

     

    為什么血清里邊有沉淀物

    血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),胎球蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻連蛋白,磷酸鈣(顯微鏡下小黑點沉淀),膽固醇等。

    1.造成沉淀的主要原因

     

    • 血清熱滅活;

    • 37℃ 孵育;

    • 頻繁的解凍與凍存操作;

    • 解凍過程中未混合;

    • 經 γ-輻照;

    • 2-8℃ 長時間儲存;

    • 在自動解凍的冰箱中儲存。

     

     

    少量的沉淀是血清解凍過程中的正?,F象,過于澄清的血清并不代表更高的品質,也可能是「預老化」(加工過程中反復凍融盡可能的去除纖維蛋白原)的結果。雖然血清中的沉淀很難預測和阻止,但合理正確的儲存和使用方法可以降低血清中沉淀的析出,同時也可采取簡單的方式去除沉淀物。

     

    2. 去除沉淀的方法

    如果血清中含有大量的沉淀,我們不建議直接過濾血清。若去除這些絮狀沉淀物,可將血清分裝至無菌離心管中,以 400 g 稍微離心,上清液直接加入培養基內一起過濾。

     

    血清是否需要熱滅活    

    如果培養的細胞用于免疫學試驗;培養ES細胞、平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。

     

    如有滅活血清的需要,可在56oC的水浴中進行30分鐘的血清熱滅活,或選購經熱滅活處理的胎牛血清。

     

    血清的儲存方法及注意事項

    建議將血清儲存在 -20℃ 條件下。

     

    血清雖然可以在-80°C下儲存,但是我們不建議在該條件下儲存,一是在-80°C條件下存儲有包裝瓶破裂的風險,另一方面解凍時巨大的溫度變化會導致產生更多的沉淀。

    血清一旦解凍,可在2-8℃ 條件下儲存 6 周。如果解凍之后的血清儲存時間需要大于 6 周,建議分裝成合適的體積并重新凍存。

     


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