亚洲精品456在线播放

  • <rp id="cdedk"></rp>
  • <tbody id="cdedk"><noscript id="cdedk"></noscript></tbody>

    <button id="cdedk"><object id="cdedk"></object></button>
  • <s id="cdedk"><object id="cdedk"></object></s><rp id="cdedk"><object id="cdedk"><blockquote id="cdedk"></blockquote></object></rp><button id="cdedk"><object id="cdedk"></object></button>

  • <rp id="cdedk"><strike id="cdedk"></strike></rp>
    申請試用裝
    人C反應蛋白(超敏)ELISA試劑盒Human High sensitive CRP ELISA KIT
    貨號:HH-112
    價格:¥3400.00/2120.00.00
    加入購物車,提交訂單信息之后,我們會第一時間與您取得聯系!
    • 產品信息
    • 產品說明(可下載)
    • 參考文獻
    • 常見問題

    C反應蛋白(超敏)定量分析酶聯免疫檢測試劑盒

     

    本試劑盒僅供科研使用。用于體外定量檢測人血清、血漿或細胞培養上清液中的CRP濃度。使用前請仔細閱讀說明書并檢查試劑組分是否完整。如有產品包裝破損或質量投拆,請在收到貨一個月之內聯系我們。

     

    CRP簡介:

    C反應蛋白(CRP)是人體內的急性反應蛋白,在人體免疫防御反應中重要的介導物,屬于穿透素家族的蛋白。CRP蛋白的前體蛋白是224殘基的蛋白,成熟的CRP有206個搭氨基酸殘基,通過非共價結合的方式形成五聚體的環狀結構。

    無論是感染還是非感染性的炎癥、組織壞死和惡性腫瘤時,人體血液中的CRP蛋白濃度都會急劇升高。在感染,炎癥反應及組織壞死中,人血清中的CRP蛋白在24~48小時內可急劇升高到正常水平的1000倍。

    在許多種細菌和真菌表面的膽堿磷酸是CRP蛋白的配體,CRP與配體的結合是依賴Ca2+的。CRP也可與受傷細胞的膜、壞死的胞核和調亡的細胞等結合。一旦與受體結合,CRP蛋白就會啟動C1q,從而引起一系列的級聯反應。CRP蛋白也會與吞噬細胞的表面Fcγ RIFcγ RII結合,從而啟動吞噬細胞的吞噬反應。

    CRP主要在肝內產生,IL-6是肝實質細胞產生CRP蛋白的主要介導物,此外IL-1和糖皮質激素也是CRP蛋白產生重要的誘導物。

     

    檢測原理:

    本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中CRP的濃度。CRP捕獲抗體已預包被于酶標板上,當加入標本或參考品時,其中的CRP會與捕獲抗體結合,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。當加入與生物素化的抗人CRP抗體后,抗人CRP抗體與CRP接合,形成夾心的免疫復合物,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。再加入親和素連接的HRP結合物,生物素與親和素結合,其它游離成分通過洗滌的過程被除去,最后加入顯色劑,若樣本中存在CRP將會形成免疫復合物,辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質,在加入終止液后呈黃色。通過酶標儀檢測,讀其450nm處的OD值,CRP濃度與OD450值之間呈正比,通過參考品繪制標準曲線,對照未知樣本中OD值,即可算出標本中CRP濃度。

     

    人高敏CRP定量分析酶聯免疫檢測試劑盒組成:

    組分

    規格(96T/48T)

    人高敏CRP預包被板

    12條/6

    標準品稀釋液

    10ml/5ml

    人高敏CRP標準品

    4支/2支(凍干)

    生物素化的抗CRP抗體

    10ml/5ml

    親和素連接的HRP結合物

    10ml/5ml

    濃縮洗滌液 20×

    30ml/15ml

    TMB底物

    10ml/5ml

    止液

    5ml/3ml

    封板膠紙

    3/2

    說明書

    1

    標本收集:

    1.標本的收集請按下列流程進行操作;

    A.細胞上清標本離心去除懸浮物后即可;

    B.血清標本應是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;

    C.血漿標本,推薦用EDTA的方法收集若待測樣本不能及時檢測,

    D.標本收集后請分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融。

    2.血清標本不應添加任何防腐劑或抗凝劑;

    3.標本應清澈透明,檢測前樣本中如有懸浮物應通過離心去除。

    4.請勿使用溶血,高血脂或污染的標本檢測,否則結果將不準確。

    注:人血清或血漿樣本請用標準品稀釋液做稀釋后再檢測,稀釋比例為200-4500倍。

     

    注意事項:

    1.試劑盒請保存在28℃。

    2.濃縮洗滌液因在低溫下可能有結晶,請水浴加熱使結晶完全溶解后再配制工作液。

    3.標準品復溶加樣后,剩余部分請丟棄。

    4.底物請勿接觸氧化劑和金屬。

    5.加樣時,請及時更換槍頭,避免交叉污染。

    6.嚴禁混用不同批號的試劑盒組份。

    7.充分混勻對保證反應結果的準性很重要,在加液后請輕輕叩擊邊緣以保證混勻。

    8.室溫反應,請嚴格控制在25~28℃。

    9.洗滌過程是至關重要的,洗滌不充分會使精確度下降并導致結果誤差較大。

    10.試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙復孔。

    11.加樣過程中避免氣泡的產生。

    12.血清和血漿標本的檢測時,檢測抗體的孵育時間應適當延長。

     

    檢測前準備工作: 

    1.試劑盒自冰箱中取出后應置室溫(25~28℃)平衡20分鐘;每次檢測后剩余試劑請及時于2~8℃保存。

    2.將濃縮洗滌液用雙蒸水或去離子水稀釋(1份加19份水)。

    3.如有5X準品稀釋液,請按所需量用雙蒸水或去離子水稀釋(1份加4水)。

    4.標準品: 按標簽復溶體積加入標準品稀釋液復溶使CRP終濃度達到10000pg/ml,室溫反應,請嚴格控制在25~28℃,靜置10~15分鐘后輕輕混懸(建議抽吸幾次)待徹底溶解,用標準品稀釋液倍比梯度稀釋后依次加入檢測孔中。(標準曲線取七個點,最高濃度為10000pg/ml,標準品稀釋液直接加入作為0濃度.)圖片2.png

    洗滌方法:

    自動洗板機或人工洗板:每孔洗滌液為300ul,注入與吸出間隔15-30秒。洗板5次。最后一次洗板完成后將板倒扣著在厚吸水紙上用力拍干。

     

    實驗過程需自備的材料:

    1.不同規格的加樣槍及相應的槍頭;   

    2.酶標儀;

    3.自動洗板機;                     

    4.去離子水或雙蒸水;

     

    操作步驟:

    1.通過計算并確定一次性實驗所需的板條數,取出所需板條放置在框架內,暫時用不到板條請放回鋁箔袋密封,保存于4℃。

    2.建議設置本底較正孔,即空白孔,設置方法為該孔只加TMB顯色液和中止液。每次實驗均需做標準品對照并畫出標準曲線。

    3.分別將標本或不同濃度標準品(100ul/孔)加入相應孔中,用封板膠紙封住反應孔,室溫(25~28℃)孵育120分鐘。如果是血清血漿樣本,不同樣本稀釋比例不一樣,一般范圍在20~450倍,如無明確范圍,建議從100倍稀釋,如果樣本濃度過高,超過檢測范圍,請加大稀釋倍數后重新稀釋檢測。

    4.洗板5次,且最后一次置厚吸水紙上拍干。

    5.加入生物素連接抗體工作液(100ul/)。用封板膠紙封住反應孔,室溫(25~28℃)孵育60分鐘。    

    6.洗板5次,且最后一次置厚吸水紙上拍干。

    7. 加入親和素連接HRP工作液(100ul/)。用封板膠紙封住反應孔,室溫(25~28℃)孵育20分鐘。

    8. 洗板5次,且最后一次置厚吸水紙上拍干。

    9. 加入顯色劑TMB100ul/孔,避光室溫(25~28℃)孵育20分鐘。

    10. 加入中止液50ul/孔,混勻后即刻測量OD450值。

     

    結果判斷:

    1.復孔的值在20%的差異范圍內結果才有效,復孔的值平均后可作為測量值。

    2.每個標準品或標本的OD值應減去本底校正孔的OD值。

    3.手工繪制標準曲線。以標準品濃度作橫坐標,OD值作縱坐標,以平滑線連接各標準品的坐標點。通過標本的OD值可在標準曲線上查出其濃度。

    4.若標本OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測,計算濃度時應乘以稀釋倍數。

    典型數值和參考曲線

    濃度pg/ml

    典型OD1

    典型OD2

    OD平均值

    0

    0.0845

    0.1143

    0.0994

    312.5

    0.2661

    0.2951

    0.2806

    625

    0.4296

    0.467

    0.4483

    1250

    0.7635

    0.7835

    0.7735

    2500

    1.2203

    1.2399

    1.2301

    5000

    1.7987

    1.8315

    1.8151

    10000

    2.7075

    2.6207

    2.6641

    高敏CRP參考標準曲線

    圖片1.png 

    注意:本圖僅供參考,應以同次試驗標準品所繪標準曲線計算標本含量。

    靈敏度,特異性和重復性:

    1.靈敏度:多次重復結果表明,最小檢出量為18.4pg/ml。

    2. 重復性:板內,板間變異系數均<10%.

     

    參考文獻:

    1. Johnson HL et al; Applications of acute phase reactants in infectious diseases J.Microbiol. Immunol. Infect. 1999, 32: 73

    2. Helgeson N et al; C - Reactive Protein : Laboratory Medicine, Vol. 2 (Race G. J., Ed.),Harper & Row, Hagerstown, chapter 29 (1973).

    3. Gewurz H et al; C-Reactive Protein and the Acute Phase Response. Adv in Int Med, 1982,27: 345

    4. Frank, R. and R. Hargreaves (2003) Nat. Rev. Drug Disc. 2:566.


    相關產品
    貨號 產品名稱 規格 價格 指令
    HH-112 人C反應蛋白(超敏)ELISA試劑盒Human High sensitive CRP ELISA KIT 96T/48T ¥3400.00/2120.00.00 放入購物車 》
    公司簡介 / Company profile
    上海傳秋生物科技有限公司
    Shanghai Chuan Qiu Biotechnology Co.,Ltd.
           公司主要依托復旦大學、同濟大學等上海地區多家著名高校,擁有一支富有經驗的開發團隊,專業從事細胞及細胞...
    聯系我們 / Contact
    電 話:021-69950217  69950218
    傳 真:021-69950218
    郵 箱:2078251929@qq.com
    郵 編:201800
    地 址:上海市嘉定區翔江公路518號寅尚產業園D座210室
    Copyright ? 2018 CHUANQIU Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved.

    滬公網安備 31011402008568號

    滬ICP備18030131號
  • 申請試用裝
  • 021-69950218

  • 亚洲精品456在线播放